Procarioti
1. DNA A
1. Idrolisi ATP
2. 9-meri
3. Apertura 13-meri
2. DNA B e DNA C
Elicasi
2 Siti ATP
2 Siti ADP
2 Siti vuoti
Posizionatore elicasi
3. Topoisomerasi
Classe I
Singolo filamento
Classe II
Doppio filamento
4. Distaccapamento posizionatore elicasi
5. DNA G
Primasi
6. DNA polimerasi III
Core proteico
subunità alfa (polimerasica)
Subunità epsilon (esonucleasica)
Pol III*
Core catalitico
2 Subunità tau
Pol III'
Pol III*
Clamp loader
Avvolgimento DNA
Apertura DNA polimerasi
Oloenzima
Pol III'
Sliding clump
2 anelli subunità beta
Mantenimento enzima
7. Rimozione inneschi
DNAsi H
Legami ribonucleotidi
DNA polimerasi I
Esonucleasica
Polimerasica
8. DNA polimerasii III
9. DNA ligasi
1. NAD -> NMN
2. Complesso DNA ligasi e AMP
3. Legame fosfodiesterico
Eucarioti
1. Cicline S -> S-cdk
2. Fosforilazione cdc
3. ORC (origin recognition complex)
1. Idrolisi ATP
2. Legame replicatore
3. Proteine bolla trascrizionale
4. Elicasi (MCM)
5. Topoisomerasi
DNA topoisomerasi I
1. Taglio singolo filamento
2. Passaggio filamento sito di taglio
3. Saldatura
DNA topoisomerasi II
1. Taglio entrambi filamenti
2. Svolgimento ansa
3. Saldatura
6. DNA polimerasi alfa
Filamento veloce (1 primer)
Filamento lento (più primer)
7. DNA polimerasi
Delta
Frammenti di okazaki
RF-C -> clamp loader
Passaggio filamenti okazaki
Epsilon
Filamento veloce
PCNA -> sliding clamp
Mantiene DNA polimerasi
8. Rimozione inneschi
1. FEN1 taglia flat provocato dalla polimerasi
2. RNAsi degrada primer
9. DNA polimerasi
10. DNA ligasi
1. ATP -> AMP + PPi
2. Complesso
AMP
DNA ligasi
3. Legame fosfodiesterico
Forse legame AMP 3' P nucleotide
Istoni
Duplicazione
Tetramero H3-H4 associato
CAF-1
Dimeri H2A-H2B rilasciati
NAP-1
Modificazioni
Writers and readers
Errori
Appaiamenti non standard
Forme tautomeriche
Riparazioni
Proofreading
Struttura
Ione bivalente A
Acido aspartico
3' OH nucleotide già presente
Aumento nucleofilicità
Ione bivlente B
Acido aspartico
Fosfati nucleotide da aggiungere
Meccanismo
Appaiamento complementare
1. Rotazione 40° alfa elica
O alfa elica
Facilitazione interazione
2. Distorsione 90° ultimo nucleotide
3. Legame ad H
Appaiamento non complementare
1. Rottura legame ad H
2. Distorsione
3. Esposizione parte esonucleasica
Mismatch repair
Procarioti
1. Muts
1. Lega distorsione
2. Espone nucleotide
2. MutL e MutH tagliano
3. Formazione nick
4. Elicasi ed esonucleasi
5. DNA polimerasi
6. DNA ligasi
Eucarioti
1. MLH
1. Lega distorsione
2. Espone nucleotide
2. MSH talgia
3. Formazione nick
4. MCM ed esonucleasi
5. DNA polimerasi
6. DNA ligasi