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模板制备
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基因组DNA提取
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柱式
- EasyPure Genomic DNA Kit
- EasyPure Plant Genomic DNA Kit
- EasyPure Blood Genomic DNA Kit
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手提
- BloodZol
- PlantZol
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RNA提取
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样品保存
- RNAhold
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柱式
- EasyPure RNA Kit
- EasyPure Viral DNA/ RNA Kit(Carrier RNA)
- EasyPure Plant RNA Kit
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手提
- TransZol
- TransZol Up
- TransZol Plant
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PCR产物制备
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1 PCR/RT-PCR详见“基因克隆篇”
- PCR(基因组-PCR产物)
- RT-PCR(RNA-PCR产物)
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2 PCR产物纯化(可选)
- EasyPure PCR Purification Kit(直接纯化)
- EasyPure Quick Gel Extraction Kit(胶回收纯化)
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3 电泳检测详见“基因克隆篇”
- DNA Marker
- 染料(GelStain)
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载体构建
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4 阳性克隆鉴定
- PCR、酶切鉴定
- 测序鉴定
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3 质粒小提
- ArtMedia Plasmid Culture(高效培养基)
- EasyPure Plasmid MiniPrep Kit
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2 转化
- 克隆感受态细胞(Trans1-T1等 )详见“基因克隆篇”
- 抗生素
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1 连接
- T4 DNA Ligase(片段和载体客户自己提供)
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真核载体
- pEASY-E1 Expression Kit(N端6×His)
- pEASY-E2 Expression Kit(C端6×His)
- T7lac 启动子严谨调控表达
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蛋白表达及纯化
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1 表达感受态细胞
- BL21(DE3) 非毒性蛋白的表达
- BL21(DE3) pLysS 降低目的基因的背景表达水平。适用于毒性和非毒性蛋白的表达
- Transetta(DE3)补充6种稀有密码子对应的tRNA
- TransB(DE3)有助于形成更多的二硫键,增加蛋白的可溶性
- BL21tac(pGEX、pMal)适用于非T7启动子
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2 蛋白诱导
- 培养基(ArtMedia Protein Expression)
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3 蛋白纯化
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纯化填料
- ProteinPure Ni-NTA Resin
- ProteinPure GST Resin
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纯化柱
- Affinity Chromatographic Column
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蛋白检测
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蛋白电泳
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非预染Marker
- ProteinRuler I (12-80 kDa)
- ProteinRulerII (12-100 kDa)
- ProteinRulerIII (25-120 kDa)
- ProteinRuler Ⅳ (30-200 kDa)
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预染Marker
- Blue Plus Protein Marker (16-94 kDa)
- Blue Plus II Protein Marker (14-100 kDa)
- Blue PlusIII Protein Marker (25-170 kDa)
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Western Blot
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蛋白定量
- Easy Protein Quantitative Kit
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Western Marker
- EasySee Western Marker (20-90 kDa)
- EasySee II Western Marker (30-150 kDa)
- Western Blot Kit
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抗体
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一抗
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标签抗体
- Myc、Flag、HA、V5、His、GST、MPB
- 用于Western,Elisa
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内参抗体
- Anti-β-Tubulin、Anti-β-Actin Mouse
- 用于Human、Rat、Mouse、Goal等种属,Western
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二抗
- Goat Anti-Rabbit IgG(H+L)
- Goat Anti-Mouse IgG(H+L)
- 用于Western,Elisa